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新型芯片檢測早期HIV只需4小時45分鐘

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關(guān)鍵詞: HIV,檢測工具,芯片,疾病診斷

    2月15日,《PLOS one》雜志上發(fā)表了一篇文章,向我們展示了一種超敏感、超快速的HIV檢測新方法。這款設(shè)計在感染后一周就可以檢測,且總時長為4小時45分鐘,在測試當(dāng)天即可拿到結(jié)果。

    早期HIV感染檢測是阻止艾滋病蔓延的關(guān)鍵點,也是改進抗病毒治療有效性的重要方式。

    核酸擴增測試(NAAT)已經(jīng)成為了發(fā)現(xiàn)血液樣本中低濃度病毒的黃金標準。但是,這類方法對技術(shù)有所要求,并且對于發(fā)展中國家來說有著高昂的成本。

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    免疫分析相對來說成本更容易接受,并且更適用于即時診斷。可是,目前很多此類方法的敏感度較低。

    我們今天要介紹的新方法有哪些優(yōu)越之處呢?先來了解一下它的結(jié)構(gòu)和原理吧。

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    生物芯片

    首先,作為一種生物傳感器,它的體積是很小的。

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    新技術(shù)采用了一種“三明治”樣的結(jié)構(gòu),結(jié)合了硅微機械結(jié)構(gòu)和金納米粒子以及抗體。

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    掃描電子顯微鏡下的單晶硅微懸臂梁陣列。

    芯片中的硅采用了單晶硅微懸臂梁陣列。單晶硅陣列與具有生物功能化的捕獲抗體結(jié)合,微懸臂梁長500微米,寬90微米,厚1微米。

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    微懸臂梁上的捕獲抗體與HIV-1的p24抗原可以特異性結(jié)合。這些捕獲抗體固定在單晶硅的陣列表面,防污分子被固定在懸臂和抗體間的空隙,以減少底表面上的非特異性相互作用。

    第一步,將1毫升血清與上述結(jié)合捕獲抗體的硅芯片在37℃孵育1小時,使得血樣中存在的HIV-p24抗原與傳感器表面的捕獲抗體相結(jié)合。

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    下一步,嚴格除去微懸臂梁上的非特異性吸附。

    納米金粒子直徑在100nm左右,表面被檢測抗體包被。檢測抗體能夠與p24抗原特異性結(jié)合。

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    第三步,將捕獲p24抗原后的芯片與1毫升納米金粒子溶液(10微克/毫升)在37℃環(huán)境中再次孵育,15分鐘后捕獲的p24蛋白就可以被標記出來。

    最后,將未結(jié)合的粒子漂洗除去,留下的金納米粒子就是已經(jīng)與HIV-1的p24蛋白相結(jié)合的。

    測試總共需要4小時45分鐘,這是非常迅速的。

    意味著你可以在體檢的同一天拿到診斷結(jié)果,甚至完成重復(fù)測試。

    納米機械信號與光電等離子轉(zhuǎn)導(dǎo)

    金納米粒子可以通過納米機械信號(附加質(zhì)量)和光電等離子轉(zhuǎn)導(dǎo)(散射強度)來測算血清中p24的濃度。

    新型芯片檢測早期HIV只需4小時45分鐘

    【頂圖】通過測試微懸臂梁震動頻率的改變得到附加質(zhì)量。

    【底圖】免疫測定處理后微懸臂梁的暗視野成像獲得散射信號強度。

    超低的檢出限

    金納米粒子給予的機械信號和光學(xué)信號都可以作為p24濃度的測定指示。這種精密靈敏的檢測方式使得免疫分析對HIV抗原檢測的檢出限大大降低。

    標準的核酸擴增試驗(NAAT)檢出限為20-35RNA拷貝/毫升,即10-18病毒顆粒/毫升,這通常是HIV感染第二周后血漿中出現(xiàn)的病毒濃度。第四代免疫分析對p24的檢出限可以達到10皮克/毫升,這通常是感染后3-4周所能達到的濃度。

    新型的生物芯片基于納米機械信號和光電等離子轉(zhuǎn)導(dǎo)來測算血清中p24的濃度,檢出限可以降低到10-5皮克/毫升。

    這種高敏感度的檢測可以大大縮短HIV的窗口期(病毒在血液中開始復(fù)制但不能被檢測到的時間段),血液中的HIV病毒在感染后一周就可以被檢測到。

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    設(shè)計已經(jīng)取得了CSIC的專利許可,也可以用來作為某些癌癥的早期發(fā)現(xiàn)。

    在成熟的微電子制造支持下,這種芯片具有低成本、大批量生產(chǎn)的可能,因而,具有廣泛應(yīng)用的巨大潛力。

    (審核編輯: 林靜)

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